大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于结构设计常用的连结方式的问题,于是小编就整理了1个相关介绍结构设计常用的连结方式的解答,让我们一起看看吧。
目前已知有三种方法可以用来在体外连接DNA片段:
第一种方法是,用DNA连接酶连接具有互补粘性末端的DNA片段;(人教版高中生物选修3中提到的E·coliDNA连接酶,来源于大肠杆菌,可用于连接粘性末端;T4DNA连接酶,来源于T4噬菌体,可用于连接粘性末端和平末端,但连接效率低。)
第二种方法是,用T4DNA连接酶直接将平末端的DNA片段连接起来,或是用末端脱氧核苷酸转移酶给具平末端的DNA片段加上poly(dA)-poly(dT)尾巴之后,再用DNA连接酶将它们连接起来;
第三种方法是,先在DNA片段末端加上化学合成的衔接物或接头,使之形成粘性末端之后,再用DNA连接酶将它们连接起来。这三种方法虽然互有差异,但共同的一点都是利用DNA连接酶所具有的连接和封闭单链DNA的功能。
粘性末端DNA片段的连接 DNA连接酶最突出的特点是,它能够催化外源DNA和载体分子之间发生连接作用,形成重组的DNA分子。
平末端DNA片段的连接 常用的平末端DNA片段连接法,主要有同聚物加尾法、衔接物连接法及接头连接法
组成DNA分子的基本单位是脱氧核苷酸,它是由一分子磷酸、一分子脱氧核糖、一分子含氮碱基组成的。三个分子的相对位置是脱氧核糖在中央,磷酸和含氮碱基在两侧。
组成DNA的基本单位的三个分子的连接顺序,是磷酸—脱氧核糖—腺嘌呤。
碱基间通过氢键连在一起,而且A 与T 有两个氢键,G 与C 有三个氢键;通过这些氢键维持了DNA 分子结构的稳定。
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